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了解奶牛群的健康狀況對(duì)于提高奶牛群的生產(chǎn)效率和可持續(xù)性生產(chǎn)至關(guān)重要（Pulina et al.2017）。在影響奶牛的疾病中，乳腺炎仍然是重要的一種，會(huì)嚴(yán)重影響奶農(nóng)的利潤(rùn)（Summer等，2015； Goncalves等，2018；Heikkilä等，2018）。此外，這對(duì)于謹(jǐn)慎使用抗生素的治療方案（例如選擇性干牛療法）時(shí)同樣很重要（Trevisi等人2014; Zecconi，Sesana等人2018）。確實(shí)，與無(wú)傳染性畜群相比，感染性畜群（牛支原體，金黃色葡萄球菌，無(wú)乳鏈球菌）的存在需要使用更多的抗生素（Zecconi et al。2004; Zecconi 2007）。

大容量罐裝牛奶（BTM）采樣被認(rèn)為是成本/效益比佳的方式，可用來(lái)評(píng)估牛群中傳染性病原體的存在，操作簡(jiǎn)單且可代表整個(gè)牛群奶的生產(chǎn)（Jayarao和Wolfgang 2003）。但是，它有兩個(gè)主要的關(guān)鍵因素：1）受稀釋的影響，檢測(cè)出陽(yáng)性結(jié)果的幾率受感染牛的數(shù)量和產(chǎn)奶量的影響；2）在擠奶過程和采樣過程中，被污染的機(jī)會(huì)相對(duì)較高。水庫(kù)采集到的病原體（即環(huán)境病原體）不能被作為存在奶牛感染的確認(rèn)，因?yàn)檫@可能主要是由于環(huán)境污染。 BTM污染水平也可能損害常規(guī)微生物分析的準(zhǔn)確性（Jayarao和Wolfgang 2003）。正因如此，BTM采樣應(yīng)僅限于牛奶中進(jìn)行傳染性病原體的診斷，那么陽(yáng)性結(jié)果意味著牛群中至少存在一頭奶牛感染。不幸的是，由于先前所述的稀釋問題，陰性結(jié)果也不能保證該牛群沒有傳染性病原體。

通過開發(fā)實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑（qPCR）對(duì)BTM對(duì)病原微生物進(jìn)行分析，成為BTM樣品檢測(cè)傳染性病原體的一個(gè)重要的進(jìn)展。這種檢測(cè)方法針對(duì)的是特定細(xì)菌，因此不會(huì)非特異性擴(kuò)增目標(biāo)細(xì)菌以外的細(xì)菌，可以將污染的影響降至低。樣品可以被冷凍，或者可以添加防腐劑，從而有利于樣品的運(yùn)輸和存儲(chǔ)。此外，這些技術(shù)是半定量的，因此可以估算出特定病原體的細(xì)菌數(shù)。 qPCR是一種在北歐國(guó)家/地區(qū)廣泛使用的工具（Koskinen等，2010； Kathholm等，2012。這項(xiàng)技術(shù)可以確定三種*的傳染性病原體（無(wú)乳鏈球菌，金黃色葡萄球菌和牛分枝桿菌）和環(huán)境性（Prototheca spp）原壁菌屬，一旦爆發(fā)，原壁菌屬的特征是擴(kuò)散大，細(xì)胞數(shù)高（Pieper et al.2012）。

近日在意大利的科學(xué)家，通過采用丹麥DNA Diagnostic公司設(shè)計(jì)的Mastitis 4E 檢測(cè)試劑盒對(duì)罐裝牛奶（BTM）中主要傳染性病原體進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查。這項(xiàng)研究是對(duì)意大利西部倫巴第地區(qū)四個(gè)地區(qū)的581只牧群進(jìn)行的，其研究結(jié)果發(fā)表在新一期的Italian Journal of Animal Science 。他們?cè)u(píng)估了四個(gè)風(fēng)險(xiǎn)因素（區(qū)域，牛群規(guī)模，平均產(chǎn)奶量和體細(xì)胞計(jì)數(shù)SCC）與BTM中病原體之間的關(guān)聯(lián)?？傮w數(shù)據(jù)顯示，在42％的牛群中檢測(cè)到金黃色葡萄球菌，牛群中無(wú)乳桿菌占10％，變形桿菌屬占11％，牛分枝桿菌占1.5％。所應(yīng)用的GLM模型顯示BTM結(jié)果，地區(qū)，畜群大小及其相互作用對(duì)SCC和產(chǎn)奶量方差的顯著影響。特別是金黃色葡萄球菌或無(wú)乳桿菌對(duì)牛奶產(chǎn)量的變化有顯著影響，而對(duì)SCC的影響較小。傳染性病原體的*流行率會(huì)顯著影響牛奶的特性和產(chǎn)量，從而影響畜群的經(jīng)濟(jì)效益，并表明有必要實(shí)施控制計(jì)劃以降低傳染性病原體的感染率，同時(shí)這也將減少抗菌素的使用。 

研究總結(jié)：

1. *對(duì)大量意大利奶牛樣本進(jìn)行的散裝罐裝牛奶樣本中傳染性病原體流行率的初步研究，觀察到的患病率超過50％。
2. 研究估計(jì)了大量意大利奶牛罐裝牛奶中牛分枝桿菌的患病率，觀察到的患病率為1.5％。
3. 傳染性病原體的流行對(duì)牛奶產(chǎn)量和SCC有重要影響。
4. 散裝罐裝牛奶SCC確認(rèn)識(shí)別受感染牛群的準(zhǔn)確性較低。

qPCR試劑盒介紹：

Mastit 4乳腺炎檢測(cè)試劑盒將在3小時(shí)內(nèi)為您提供準(zhǔn)確可靠的結(jié)果。這些病原菌是導(dǎo)致 95 至 99% 的臨床和亞臨床奶牛乳腺炎病例的病原菌。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

• 基于實(shí)時(shí)熒光定量 PCR方法：可鑒別樣品中目標(biāo) DNA 的準(zhǔn)確且靈敏的技術(shù) 
• 可用于分析新鮮和保存的牛奶樣品、牛奶留樣以及罐裝牛奶樣品 
• 驗(yàn)證結(jié)果表明，與傳統(tǒng)方法相比，該檢測(cè)法擁有優(yōu)異的分析特異性和靈敏度，即使是培養(yǎng)時(shí)某些情況下  “無(wú)生長(zhǎng)跡象”的樣品也可以重新評(píng)估。 
• 可準(zhǔn)確檢測(cè)出活菌、死菌以及生長(zhǎng)抑制的微生物，減少了"無(wú)生長(zhǎng)跡象"結(jié)果
• 一次可同時(shí)檢測(cè)金黃色葡萄球菌，凝固酶陰性葡萄球菌，β-內(nèi)酰胺酶基因（葡萄球菌），無(wú)乳鏈球菌，乳酸鏈球菌，乳房鏈球菌，牛支原體，支原體屬，原壁菌屬，大腸桿菌，克雷伯菌，腸球菌和乳酸乳球菌的檢測(cè)。
• 靈活的組合，包括4,8,12或16個(gè)PCR靶標(biāo)的試劑盒。